【摘要】樹立了蔬菜中乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威殘留量氣相色譜同時剖析辦法。采用分散固相萃取技術，在提取液中參加c18、石墨炭黑、psa等吸附劑粉末停止凈化，依據檢測器選擇溶劑置換，采用db1701毛細管柱別離，μecd檢測。13種農藥的濃度范圍在0.002～0.05mg/kg時，回收率在80%～100%之間、rsd為1%～6%。各農藥的檢出限為：氟蟲腈、環氟菌胺0.002mg/kg；苯氧菊酯、甲草胺、乙草胺0.004mg/kg；多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威0.01mg/kg。該辦法步驟簡單，凈化效果好，具有良好的靈敏度、回收率和重現性。
1、引言
農藥殘留和食品安全問題在國際社會遭到普遍關注，食品農產品的農藥殘留檢測項目日益增加、限量請求日益嚴厲。在剖析儀器高度開展的今天，樣品的處置技術在農藥殘留剖析中占領越來越重要的位置。如今的前處置技術多采用自制填充柱、spe小柱或基質固相分散技術[1,2]。采用填充柱凈化法和基質固相分散技術費時并耗費大量的有機試劑；采用spe小柱凈化，經常多種分離運用，招致本錢較高。2003年美國農業部提出了分散型固相萃取技術[3]，關于此凈化辦法，現有文獻[4～6]中大部分只采用psa凈化，psa吸附劑具有弱的陰離子交流才能，有利于吸附樣品基質中的有機酸、糖以及色素，但關于基質復雜的蔬菜凈化效果并不太理想。本辦法在實驗的基礎上創新性的增加了c18、石墨炭黑等吸附劑粉末同時凈化，依據氣相色譜μecd檢測器停止溶劑轉溶，實現了對基質復雜的蔬菜中乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺及茚蟲威等多種農藥殘留的快速檢測。
2、實驗部分
2.1儀器和試劑
agilent6890n氣相色譜儀，配μecd檢測器、自動進樣器；渦流混勻器（ika公司）；研磨機（德國gm公司）；離心機（中國安亭公司）；電子天平（梅特勒公司）；均質器（ika公司）。乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威等農藥標準品（dr.公司的有證標準物質）；正己烷、丙酮、乙腈均為色譜純；冰醋酸：優級純；無水乙酸鈉：剖析純；無水硫酸鎂：剖析純（500℃馬弗爐內烘5h，冷卻取出裝瓶備用）；psa粉；c18粉；氨基粉（nh2）；石墨碳黑粉；0.1%冰醋酸/乙腈溶液（移取1mｌ冰醋酸參加1000ml乙腈混勻）。
2.2實驗辦法
2.2.1標準工作液的配制
稱取乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯、多效唑、環氟菌胺、氟蟲腈、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威標準品各10.0mg,用丙酮溶解后，置于13個100ml棕色容量瓶中，并用丙酮定容至刻度，混勻，濃度分別為100mg/l，分別移取以上標準液氟蟲腈、環氟菌胺(a組)各1.0ml,甲草胺、乙草胺、苯氧菊酯（b組）各2.0ml,多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威（c組）各5.0ml置于100ml棕色容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，a組、ｂ組和ｃ組標準溶液濃度分別為1．０、２．０和５．０mg/l。
2.2.2樣品制備及提取、凈化
稱取樣品適量，置于100ml塑料離心管中，參加0.1%醋酸/乙腈溶液10ml，正己烷5ml，無水硫酸鎂5.0g,無水乙酸鈉2.0g，用玻璃棒充分攪拌均勻，于均質機上高速均質2min，5000r/min高速離心8min，移取全部上清液于15ml塑料離心管中，氮氣吹干，準確參加0.1%醋酸/乙腈+正己烷溶液（1+1）2ml溶解殘渣,1400r/min渦漩混合2min，溶解液轉移入盛有適量psa、c18粉、石墨碳黑粉的離心管中。以1400r/min渦漩混合2min離心。取上清液1ml，置于離心管中氮吹至近干，用正己烷溶解，定容至1ml，過0.22μm濾膜，供gc測定。若樣品為含硫醚類化合物蔬菜[7,8]如蔥、蒜苔等，依據樣品情況切塊或切段，采用格蘭仕微波爐中火加熱30s，樣品再打碎稱取適量停止提取及凈化。
2.2.3色譜條件
db1701毛細管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；載氣：高純氮，純度＞99.999%；柱溫：60℃（1.25min）20℃/min180℃(7min)（10℃/min）230℃（7min）（10℃/min）270℃（15min）；柱流速：1.4ml/min，恒流；進樣口溫度：250℃;檢測器：μecd；檢測器溫度：300℃；進樣量：1μl。
3、結果與討論
3.1吸附劑粉末的優化選擇
在相同混標溶液中分別參加psa、石墨碳黑、c18、氨基粉等不同的吸附劑粉末處置，每組6個平行樣，所得的回收率數據見表1，石墨炭黑粉等去除色素等雜質的效果好，但是對茚蟲威吸附較強、用量要適量，氨基粉與psa凈化效果相同，但氨基粉對多種農藥的吸附性均較強，c18和psa對上述13種農藥回收率影響較小。所以本實驗選擇psa、石墨碳黑、c18為吸附劑加強凈化效果。表113種農藥的混合標準品分別經4種吸附劑處置后的回收率（略）
3.213種農藥在不同基質中的回收率
吸附劑粉末的用量也是影響前處置效果的重要因素，應依據樣品情況和目標物性質通過實驗選擇合適的吸附劑用量。關于蔬菜樣品吸附劑粉末用量范圍一般為：psa粉100～200mg、c18粉100～200mg、石墨碳黑50mg。辦法中樣品為菠菜、黃桃、胡蘿卜，樣品色素重，如果僅采用psa，色素及干擾物去除效果不理想，凈化液顏色較深、干擾峰多、基線高，結果難判斷及定量（圖1a）。所以實驗采用150mgpsa、150mgc18、石墨碳黑粉50mg，凈化效果較好，凈化液呈淺色或無色，目標峰附近無大干擾峰（圖1b），添加回收率見表2（濃度為0.01mg/kg）。表213種農藥（濃度均為0.01mg/kg）在胡蘿卜、黃桃、菠菜樣品中的回收率。
3.313種農藥的保留時間、線性范圍、相關系數及檢出限
取系列濃度的混合標準工作液，依次進樣，以色譜峰面積對濃度作標準曲線，得13種農藥的線性方程及相關系數，在0.05～10mg/l之間線性關系良好。表313種農藥保留時間、線性范圍、相關系數和檢出限。
3.4辦法回收率、精密度
在已知不含農藥殘留的菠菜樣品中分別參加不同濃度的混合標準工作液(a、b、c３組的混標溶液)，按本辦法停止提取、凈化和檢測，以峰面積計算各種農藥在0.002～0.05mg/kg添加水平的回收率（同一水平樣品組n=6），計算各農藥的平均回收率及相對標準偏差(見表4)，標準品譜圖見圖2（0.1mg/l）、添加回收譜圖見圖4（0.01mg/kg）,氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯在本實驗中所采用的db1701的色譜柱上不能完全別離，但在db5色譜柱上可完全別離。辦法檢出限為：氟蟲腈、環氟菌胺均為0.002mg/kg;苯氧菊酯、甲草胺、乙草胺均為0.004mg/kg；多效唑、咪唑菌酮、氯菊酯、氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氰戊菊酯、丙炔氟草胺、茚蟲威均為0.01mg/kg，完全滿足蔬菜中農藥殘留量的檢測請求。表413種農藥的回收率實驗結果。
3.5小結
本辦法用分散型固相萃取氣相色譜法對蔬菜中的乙草胺、甲草胺、苯氧菊酯等13種殘留停止檢測。依據蔬菜樣品情況及目標物性質選擇多種吸附劑粉搭配運用，并對其用量停止實驗確定。此凈化辦法減少了雜質干擾，色譜峰別離度好，具有良好的精密度及較低的辦法檢測低限。通過對100批樣品的檢測和協作實驗室驗證了本辦法的實用性。
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